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当期目录

2023年 第14卷 第2期 刊出日期:2023-06-25
上一期   
述评
仿生策略在牙周再生领域的研究进展
吴瑞鑫 陈发明
口腔生物医学. 2023, 14(2):  69-73. 
摘要 ( 81 )  
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牙周组织是一种由软硬组织有机结合形成的分层结构明显的复合体。牙周炎症破坏牙周支持组织,进而导致牙齿松动甚至脱落。现有治疗方案只能在控制炎症进展的基础上,实现一定程度的牙周组织再生,远未达到牙周组织结构完全再生和生理功能全部恢复的临床治疗目标。本文从结构仿生和力学仿生两方面回顾了牙周组织工程领域的最新进展,总结了仿生策略在牙周组织再生和功能重建方面的经验,旨在为本领域研究提供参考借鉴。
论著
氢氧化钙糊剂对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响
马艳霞 李泽汉 曹灵 张筱岚 于金华
口腔生物医学. 2023, 14(2):  74-79,96. 
摘要 ( 112 )  
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目的:研究氢氧化钙糊剂浸提液对大鼠骨髓间充质干细胞(BMMSCs)成骨向分化的影响,为其临床使用提供理论依据。方法:全骨髓贴壁法分离培养大鼠BMMSCs,流式细胞仪进行细胞鉴定,不同条件诱导细胞后进行茜素红染色、油红O染色及阿利新蓝染色,鉴定细胞成骨、成脂及成软骨分化能力。将氢氧化钙糊剂烘干、研磨成粉后,制作氢氧化钙糊剂浸提液及氢氧化钙糊剂条件培养基(CH),使用不同浓度CH(0、0.02、0.2、1、1.5、2 g/L)培养大鼠BMMSCs,碱性磷酸酶(ALP)活性测定筛选最佳作用浓度用于后续实验。大鼠BMMSCs经CH诱导后,ALP染色、ALP活性测定、茜素红染色检测其ALP活性及矿化能力的变化,Western blot检测细胞成骨相关指标Ⅰ型胶原α1(COL1A1)、ALP、Runt相关转录因子2(RUNX2)、成骨相关转录因子(OSX)的表达水平变化。结果:成功分离培养了大鼠BMMSCs,具有成骨、成脂及成软骨分化等间充质干细胞特性;0.2 g/L为CH诱导大鼠BMMSCs ALP活性的最佳作用浓度(P<0.01),使用该浓度CH培养基处理大鼠BMMSCs后,COL1A1、ALP、RUNX2、OSX表达上调(P<0.01)。结论:氢氧化钙糊剂浸提液可促进大鼠BMMSCs成骨分化。
外周血中性粒细胞和口腔中性粒细胞免疫炎症反应的差异比较
朱沁 高岚青 仝悦 孙颖
口腔生物医学. 2023, 14(2):  80-86. 
摘要 ( 114 )  
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目的比较口腔中性粒细胞(oPMN)和外周血中性粒细胞(cPMN)免疫炎症反应的差异,探讨oPMN维持牙周健康的作用。方法常规密度梯度离心法分离获得健康人外周静脉血来源的cPMN,离心过滤法分离获得健康人口腔含漱液来源的oPMN。采用1 μg/mL牙龈卟啉单胞菌(P. gingivalis)脂多糖(LPS)刺激,并以大肠杆菌(E. coli)LPS作为阳性对照,流式细胞术检测凋亡水平变化;Transwell实验比较白介素(IL)-8刺激前后两种细胞趋化能力的差异;ELISA检测IL-1β、IL-8和IL-10表达水平变化;流式细胞术检测两种细胞对P. gingivalisE. coli的吞噬作用;免疫荧光实验观察中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的形成,Sytox Green法对胞外DNA进行定量;Western blot检测丝裂原活化蛋白激酶1/2(MEK1/2)、细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)和核转录因子-κB(NF-κB)P65磷酸化水平的变化。结果两种LPS刺激后,与cPMN相比,oPMN凋亡增多(P<0.05)。IL-8刺激后,两种细胞趋化能力未见明显差异(P>0.05)。两种LPS刺激后,oPMN较cPMN的IL-1β、IL-8和IL-10表达水平更高(P<0.01)。oPMN吞噬P. gingivalisE. coli的能力强于cPMN(P<0.05),形成的NETs更多,胞外DNA水平、MEK1/2、ERK1/2和NF-κB P65磷酸化水平均较cPMN更高(P<0.05)。结论oPMN可能是具有过度活跃表型的中性粒细胞,其吞噬、分泌细胞因子和形成NETs的能力较cPMN增强,可能与其MEK1/2、ERK1/2和NF-κB磷酸化水平增高有关。

抑制miR-145表达影响小鼠牙种植体周围炎炎症反应的实验研究
李昊 李孔梅 叶枝茂 麦昱颖 王琪
口腔生物医学. 2023, 14(2):  87-91. 
摘要 ( 100 )  
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目的:探讨抑制miR-145对小鼠种植体周围炎炎症反应的影响。方法:将C57BL/6J雄性小鼠40只随机分为正常对照组、炎症对照组、炎症miR-NC组、炎症miR-inhibitor组。在各组上颌植入种植体,对3个炎症组拴丝形成种植体周围炎后,对炎症miR-inhibitor组局部注射miR-145抑制剂,在炎症miR-NC组局部注射miR-145抑制剂的阴性对照剂,微计算机断层扫描观察各组种植体周围骨丧失情况,苏木素-伊红染色观察种植体周围组织炎细胞浸润情况,实时荧光定量PCR检测种植体周围牙龈组织miR-145、趋化因子CC基序配体2(CCL2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素10(IL-10)、基质金属蛋白酶8(MMP8)的表达水平。结果:与正常对照组小鼠相比,3个炎症组小鼠骨丧失量及炎细胞浸润明显增加(P<0.05),牙龈组织中炎症相关因子CCL2、TNF-α、IL-1β、IL-10、MMP8表达水平升高(P<0.05);抑制miR-145表达后,种植体周围炎小鼠骨丧失量、炎细胞浸润情况改善,CCL2、TNF-α、IL-1β、MMP8表达减少,IL10表达升高(P<0.05)。结论:抑制miR-145的表达可缓解种植体周围炎炎症反应,可能与其调节牙龈组织中炎症相关因子表达有关。
小檗碱对牙龈卟啉单胞菌的体外抑制作用研究
张璇 吴娟 孙卫斌
口腔生物医学. 2023, 14(2):  92-96. 
摘要 ( 84 )  
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目的:研究小檗碱(BBR)对牙龈卟啉单胞菌(Pg)的抑制作用,探讨其作用机制。方法:浓度梯度稀释法检测BBR抑制标准菌株Pg ATCC33277、高毒菌株Pg W83的最低抑菌浓度(MIC);通过血平板实验检测BBR对Pg ATCC33277、Pg W83最低杀菌浓度(MBC);MTT实验研究BBR对Pg ATCC33277细菌活力的影响;碱性磷酸酶(ALP)活性实验检测BBR对Pg ATCC33277细胞壁的影响;通过透射电镜(TEM)和扫描电镜(SEM)观察BBR对Pg ATCC33277菌体形态的影响。结果:BBR对Pg ATCC33277、Pg W83的MIC和MBC为15.625 μg/mL;在此浓度下,BBR可以使Pg ATCC33277细菌活力明显下降(P<0.05),12 h后ALP活性降低(P<0.05)。TEM及SEM镜下观察15.625 μg/mL BBR作用后的Pg ATCC33277菌体细胞变形、皱缩,失去正常细菌形态。结论:BBR对Pg ATCC33277、Pg W83有明显抑制作用,可能通过破坏细胞壁、细胞膜来降低细菌活力。
黄芩苷通过调节自噬在炎症牙髓中发挥抗炎及促进成牙/骨作用的研究初探
王宇萌 李梦圆 徐青清 张悦蓉 江飞 张光东
口腔生物医学. 2023, 14(2):  97-104. 
摘要 ( 133 )  
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目的初步探讨黄芩苷(BA)在炎症牙髓中发挥抗炎及促进成牙/骨分化作用机制。方法用酶消化法分离提取牙髓干细胞(DPSCs),CCK-8检测不同浓度BA对DPSCs与单核-巨噬细胞(THP-1)细胞活力的影响,通过碱性磷酸酶(ALP)活性检测及染色筛选BA促进DPSCs表达ALP活性的最佳浓度;用脂多糖(LPS)构建体外炎性微环境,采用实时荧光定量PCR、Western blot检测BA对DPSCs成牙/骨向分化相关蛋白和基因表达水平变化,采用免疫荧光染色、Western bolt检测细胞自噬相关蛋白泛素结合蛋白(p62)和微管相关蛋白轻链3 Ⅱ/Ⅰ(LC3 Ⅱ/Ⅰ)的表达水平。诱导THP-1成炎症状态的M1,采用实时荧光定量PCR检测BA对其白细胞介素(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。结果当浓度≤30 μmol/L时,BA对DPSCs的增殖无明显抑制(P>0.05),0~100 μmol/L浓度的BA对THP-1细胞增殖无影响(P>0.05)。经10 μmol/L BA处理LPS刺激后的DPSCs,其ALP活性增加最明显(P<0.01),牙本质涎蛋白(DSP)、Ⅰ型胶原(COL-I)、Runt相关转录因子2(RUNX2)、成骨细胞特异性转录因子OSX、骨钙素(OCN)蛋白和基因的表达均上调(P<0.05),自噬相关蛋白p62下调,微管相关蛋白轻链3 Ⅱ/Ⅰ(LC3 Ⅱ/Ⅰ)表达上调(P<0.01)。LPS可增加THP-1中IL-1β、TNF-α、iNOS的表达(P<0.01),而10 μmol/L BA处理后上述指标均下调(P<0.05)。结论BA可能通过调节细胞自噬在炎症牙髓细胞中发挥抗炎作用,并促进其成牙/骨向分化。

羽毛角蛋白水凝胶-纳米级蒙脱石复合水凝胶对骨髓间充质干细胞生物学行为的影响及成骨性能的初探
柯越 张筱岚 马艳霞 于金华
口腔生物医学. 2023, 14(2):  105-112. 
摘要 ( 106 )  
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目的:探讨羽毛角蛋白水凝胶与蒙脱石(MMT)复合改性后对骨髓间充质干细胞(BMSCs)的生物学行为及成骨性能的影响。方法:通过改良Shindai法制备羽毛角蛋白,将羽毛角蛋白与MMT混合制备羽毛角蛋白-MMT复合水凝胶。根据MMT/羽毛角蛋白水凝胶质量比例(w/w)分为0%、1%、3%三个组。结合考马斯亮蓝染色和傅里叶红外光谱鉴定所提取的羽毛角蛋白,利用扫描电镜观察羽毛角蛋白-MMT复合水凝胶的表面形态。加入使用含羽毛角蛋白-MMT复合水凝胶浸提液的培养基培养BMSCs,通过CCK-8实验探究其生物安全性,通过碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测其对BMSCs的ALP活性的影响,通过茜素红染色观察其对BMSCs的细胞外基质矿化的影响,通过Western blot检测其对BMSCs的BMP/SMAD信号通路相关蛋白表达水平的影响。结果:结合考马斯亮蓝染色和傅里叶红外光谱证明顺利提取羽毛角蛋白,羽毛角蛋白水凝胶具有天然孔隙,当加入MMT后其形态结构会发生一定程度的改变,当MMT的比例达到3%时,复合水凝胶支架的孔径明显变小。CCK-8实验结果表明,羽毛角蛋白+3%MMT复合水凝胶的浸提液可能对BMSCs的生长有抑制作用。羽毛角蛋白+1%MMT组的ALP染色和茜素红染色明显强于其他两组,说明羽毛角蛋白+1%MMT组的浸提液对BMSCs成骨分化有促进作用。与其他两组比较,羽毛角蛋白+1%MMT组的BMSCs骨形成蛋白-2(BMP‐2)、Wnt3a、磷酸化细胞信号转导分子SMAD 1/5/8(p-SAMD 1/5/8)、Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨钙素(OCN)和Ⅰ型胶原蛋白(COL-1)蛋白表达较高(P<0.01)。结论:羽毛角蛋白-MMT复合水凝胶可通过BMP/SMAD信号通路促进BMSCs成骨向分化。
基牙预备量、基牙颜色与水门汀颜色对数字化加工的前牙单层玻璃陶瓷全冠修复体颜色影响的实验研究
周明德 蒙萌 刘志华 杨振宇 余昊翰 仇碧莹 张凌 陈吉华
口腔生物医学. 2023, 14(2):  113-118. 
摘要 ( 86 )  
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目的:研究基牙预备量、基牙颜色与水门汀颜色对数字化设计加工的前牙不同厚度的单层玻璃陶瓷全冠修复体颜色的影响。方法:按照基牙预备量(1.0、1.5 mm)、基牙颜色(IPS-ND2、ND5、ND8)以及树脂水门汀颜色(Translucent-TR、B0.5 opaque-B0.5、White opaque-WO)3个影响因素将由树脂基牙-水门汀-全瓷冠组成的全瓷冠修复体模型随机分为18组,每组10个试件。单层玻璃陶瓷全冠使用计算机辅助设计与制作(CAD/CAM)方法加工。树脂基牙使用对应颜色的IPS Nature Die树脂充填制作。各组全瓷冠修复模型使用VITA Easyshade分光光度计测定每个全瓷冠颊侧中部的颜色,使用L*a*b*系统记录色度值,并计算色差值。使用三因素方差分析检测不同因素对全瓷冠修复体色差的影响。结果:基牙预备量、基牙颜色、水门汀颜色以及三者的交互作用均对CAD/CAM加工前牙单层玻璃陶瓷全冠颜色存在显著的影响,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论:使用CAD/CAM单层玻璃陶瓷全冠进行前牙修复时,应根据基牙颜色合理设计基牙预备量和冠厚度,选择适宜颜色的水门汀进行粘接,以期达到微创、美观、持久的修复效果。
综述
脱落乳牙干细胞治疗神经系统疾病的研究进展
郭蓉 于金华
口腔生物医学. 2023, 14(2):  119-122. 
摘要 ( 85 )  
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脱落乳牙干细胞(SHED)是一种神经脊来源的牙源性干细胞,具有神经分化潜能、高度增殖能力、自我更新能力,具有神经再生和神经保护方面作用。本文结合病理特点对SHED及其衍生物在神经退行性和损伤性疾病的治疗作用进行综述。
整合素α2的研究进展
汪泽琪 吴家媛 郑吉吉
口腔生物医学. 2023, 14(2):  123-127. 
摘要 ( 82 )  
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整合素(ITG)是细胞胞膜表面重要的黏附分子家族成员之一,具备细胞与胞外基质、细胞与细胞之间的双向信号介导作用。其异二聚体ITGα2具有明显的促进细胞黏附、抑制血管生成作用和良好的成骨诱导能力。本文对ITGα2在细胞生物学性能、干细胞干性维持及分化、血管生成调节等方面的作用及其相应机制进行文献综述。
成牙骨质细胞分化调控分子的研究进展
朱禛禛 夏海斌 王敏
口腔生物医学. 2023, 14(2):  128-133. 
摘要 ( 76 )  
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牙骨质是包绕在牙根表面的骨样矿化结构,是牙周组织的重要组成部分,具有维持牙齿稳定、补偿与修复、保护牙本质等功能,牙骨质的形成和再附着是牙周组织再生的成功标志。成牙骨质细胞(CM)是牙骨质形成的功能细胞,成牙骨质细胞的分化调控机理对于认识牙骨质形成和牙周功能维护具有重要意义。本文对影响成牙骨质细胞分化的信号通路及调控分子进行综述。
牙髓间充质干细胞的生物特性及临床应用潜能
李娟 林海燕 于元松
口腔生物医学. 2023, 14(2):  134-140. 
摘要 ( 90 )  
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成人恒牙和儿童乳牙中都能分离出一种具有间充质干细胞特性的细胞群体,分别命名为牙髓间充质干细胞(DPSC)和乳牙牙髓间充质干细胞(SHED)。近年来的研究表明,牙髓来源的间充质干细胞具有增殖能力高、多向分化潜能和免疫调节能力强等特点,并且取材方便、伦理问题小,因此逐渐成为干细胞分化机制和临床治疗研究的热点,也有望成为组织再生和系统性疾病治疗的理想细胞来源。本综述对DPSC和SHED的生物学特性进行了比较,并对牙髓来源的间充质干细胞的临床应用潜能进行了分析和展望。