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当期目录

2021年 第12卷 第2期 刊出日期:2021-06-25
上一期   
述评
生物活性组织工程材料在口腔颌面部骨修复中的应用研究进展
王振铭 叶玲
口腔生物医学. 2021, 12(2):  71-76. 
摘要 ( 265 )  
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生物活性骨组织工程材料是通过特定加工工艺或功能化等手段获得的具有一定成骨活性的3D支架,其广泛用于骨损伤修复,并显示出良好的临床治疗效果。影响骨组织工程材料成骨诱导活性的物理化学信号主要有生物活性陶瓷、生物活性离子、材料结构和生物分子等。本文主要从这几个方面探讨不同因素及联合作用在口腔颌面骨修复中的应用及治疗效果,重点讨论目前生物活性组织工程支架的构建策略及其在颌骨、牙槽骨和牙体硬组织缺损修复方面的应用,评述骨组织工程材料不同生物活性要素在骨损伤修复中的研究现状,为口腔颌面骨修复活性材料的开发提供参考依据。
论著
掺镁微弧氧化钛表面促进大鼠BMSCs成骨分化的研究
王桂芳 蒋欣泉
口腔生物医学. 2021, 12(2):  76-81. 
摘要 ( 235 )  
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目的:探讨掺镁微弧氧化钛表面对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化活性的影响。方法:以含钙、磷电解液微弧氧化处理钛表面(MAO)为对照组,通过在电解液中加入不同浓度镁构建低镁(Mg-1)和高镁(Mg-2)含量微弧氧化处理钛表面;采用场发射扫描电子显微镜(SEM)观察表面相貌结构,X射线光电子能谱仪(EDS)分析材料表面化学元素,MTT法检测钛表面大鼠BMSCs细胞代谢活性,细胞骨架染色观察钛表面细胞生长情况,碱性磷酸酶(ALP)染色/半定量分析细胞ALP蛋白的表达,实时定量RT-PCR检测Alp、Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(Ocn)、骨形态发生蛋白2(Bmp2)、骨涎蛋白(Bsp)、骨桥蛋白(Opn)等成骨分化基因的表达,免疫荧光检测OCN蛋白的表达。结果:BMSCs在MAO、Mg-1、Mg-2三组钛表面生长状态均良好,Mg-2组BMSCs增殖代谢活性最佳(P<0.05);与MAO组相比,Mg-1组和Mg-2组提高了材料表面细胞成骨分化相关基因和ALP、OCN蛋白的表达,其中Mg-1组促进Runx2、Alp基因和ALP蛋白表达的作用更佳,Mg-2组上调Ocn、Bmp2、Bsp、Opn基因和OCN蛋白表达更明显(P<0.05)。结论:镁离子掺入微弧氧化钛表面具有良好生物学相容性,促进大鼠BMSCs增殖活性,显著提高钛表面的成骨分化性能,具有潜在的促骨结合作用。
CM-Dil标记人牙龈间充质干细胞在大鼠颅骨缺损修复模型中的示踪研究
许璐 顾春宁 石安源 王斌 秦海燕
口腔生物医学. 2021, 12(2):  82-86. 
摘要 ( 291 )  
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目的:探讨氯甲基苯甲酰氨(CM-Dil)荧光染料在体外标记人牙龈间充质干细胞(hGMSCs)后对其增殖、分化能力的影响以及在体内荧光标记持续时间。方法:组织块法原代培养hGMSCs,采用流式细胞术检测间充质干细胞表面标志物,然后以CM-Dil标记hGMSCs,CCK-8检测标记后细胞的增殖;标记及未标记的细胞进行成骨及成脂诱导培养21?d后,分别进行茜素红染色和油红O染色。大鼠颅骨缺损实验检测CM-Dil标记的hGMSCs体内标记效果。结果:原代培养的hGMSCs高表达CD105、CD90和CD73,而阴性表达CD14、CD34、CD19、CD45和人类白细胞DR抗原(HLA-DR),符合间充质干细胞表面特征。与对照组相比,CM-Dil并不影响hGMSCs的增殖和成骨、成脂分化能力(P>0.05)。体内移植的CM-Dil标记hGMSCs在第8周时仍可检测到红色荧光。结论:CM-Dil在体外标记hGMSCs不会影响hGMSCs的干细胞特性,且体内标记时间长达8周,可作为今后干细胞体内标记示踪的方法之一。
miR-206-3p调控RAW264.7细胞向破骨细胞分化的体外研究
吴青蘅 王徐雯 朱昕妍 山轶凡 周宣 顾嘉雯 郭舒瑜
口腔生物医学. 2021, 12(2):  87-90. 
摘要 ( 290 )  
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目的:探究miR-206-3p对破骨细胞生成的影响。方法:RAW264.7细胞体外诱导破骨分化,过表达或抑制其miR-206-3p,实时定量RT-PCR检测miR-206-3p表达水平。通过纤维状肌动蛋白染色、抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察破骨细胞形成,实时定量RT-PCR及Western Blot检测破骨细胞分化相关基因——活化T细胞核因子1(NFATc1)的表达。结果:过表达miR-206-3p后,破骨细胞生成受到抑制,NFATc1表达水平降低,而敲减miR-206-3p后可促进破骨细胞的生成,NFATc1表达显著上调(P<0.05)。结论:miR-206-3p通过影响NFATc1的表达,调控RAW264.7细胞向破骨细胞分化。
骨质疏松小鼠骨内糖胺聚糖的变化
牛萍萍 李俊辉 薛徽 孙瑶 周济 张帅
口腔生物医学. 2021, 12(2):  91-94. 
摘要 ( 249 )  
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目的:分析骨质疏松小鼠骨组织中糖胺聚糖(GAG)的含量变化。方法:构建雌激素缺失骨质疏松小鼠动物模型,通过Micro-CT和组织学切片染色确定模型构建是否成功;利用甲苯胺蓝染色和实时定量RT-PCR对比分析假手术组和骨质疏松组小鼠股骨GAG含量及相关合成酶基因表达差异。结果:手术摘除双侧卵巢三个月后,小鼠总脂肪增加、体重增加、子宫湿重减少、骨密度降低,建模成功。与假手术组相比,骨质疏松小鼠骨组织GAG含量减少,GAG合成酶基因表达水平下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:GAG与骨质疏松发生发展密切相关。
牙周炎中M1型巨噬细胞与破骨细胞形成相关性研究
李俊辉 林婷婷 孙瑶
口腔生物医学. 2021, 12(2):  95-99. 
摘要 ( 271 )  
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目的:探究牙周炎中M1型巨噬细胞与破骨细胞形成的相关性。方法:取2月龄C57BL/6J小鼠,丝线结扎建立右侧上颌牙周炎模型,左侧上颌作为自身对照。术后7?d收样,Micro-CT扫描分析牙槽骨吸收情况,苏木素-伊红(HE)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、CD80和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)免疫荧光染色观察破骨细胞及M1型巨噬细胞数量及位置情况,实时定量RT-PCR检测白细胞介素(Il)-1β、Il-6、肿瘤坏死因子α(Tnf-α)、iNos等M1型巨噬细胞相关基因及破骨细胞相关免疫球蛋白样受体(Oscar)、基质金属蛋白酶9(Mmp9)、组织蛋白酶K(Ctsk)、Trap等破骨细胞相关基因表达,对M1型巨噬细胞与破骨细胞的相关基因表达、M1型巨噬细胞与破骨细胞的数量进行相关性分析,对M1型巨噬细胞与破骨细胞定位分布进行分析。结果:成功构建小鼠牙周炎模型,上颌牙周炎侧牙槽骨骨组织参数明显下降(P<0.05);牙周炎侧M1型巨噬细胞及破骨细胞数量明显增加(P<0.05);牙周炎侧Il-1β、Il-6、Tnf-α、iNos等M1型巨噬细胞相关基因及Oscar、Mmp9、Ctsk、Trap等破骨细胞相关基因表达较对照侧高(P<0.05);牙周炎中破骨细胞相关基因与M1型巨噬细胞相关基因表达水平呈显著正相关(P<0.05),M1型巨噬细胞数量与破骨细胞数量呈显著正相关(P<0.05);TRAP染色和iNOS免疫荧光共染结果显示,破骨细胞位于的牙槽骨表面周围有较多M1型巨噬细胞分布。结论:牙周炎时,M1型巨噬细胞和破骨细胞数量均显著增加,且呈显著正相关,牙槽骨周围的M1型巨噬细胞和牙槽骨表面的破骨细胞具有相邻的定位关系。
牙龈卟啉单胞菌和伴放线聚集杆菌在江苏汉族牙周炎人群中的分布研究
杨勰 付子波 曹羡梓 陈佳璐 孙颖
口腔生物医学. 2021, 12(2):  100-105. 
摘要 ( 263 )  
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目的:从龈下菌斑总菌数、牙龈卟啉单胞菌(P. gingivalis)、伴放线聚集杆菌(A. actinomycetemcomitans)及白细胞毒素(leukotoxin,LTX)在江苏汉族牙周炎人群中分布的角度,比较牙周病2018年新分类与1999年分类。方法:纳入73名牙周炎患者和26名牙周健康者,分别按照牙周病2018年新分类与1999年分类对牙周炎人群分组。初诊时记录全口探诊深度(PD)、临床附着丧失(CAL)、牙龈指数(GI)和菌斑指数(PLI),并收集龈下菌斑。采用实时定量PCR检测龈下菌斑中总菌、P. gingivalis和A. actinomycetemcomitans数量,采用PCR检测A. actinomycetemcomitans毒力因子LTX的携带率,比较上述指标在不同的牙周炎分类法间的分布差异。结果:慢性牙周炎和侵袭性牙周炎患者之间,总菌和P. gingivalis数量无显著差异(P>0.05),A. actinomycetemcomitans数量和LTX阳性率存在差异(P<0.05),所有检出的LTX均为低毒型。不同牙周炎分期分级组间,菌量和LTX阳性率存在差异(P<0.05)。PD、CAL、GI与总菌、P. gingivalis、A. actinomycetemcomitans数量间存在相关性(P<0.05)。结论:2018年牙周病新分类能较好的反映江苏汉族牙周炎患者的微生物学特征。
血红素浓度对双菌生物膜中牙龈卟啉单胞菌致病潜力的影响
郭艳阳 王昱 顾宁 汪宜瑾 靳雅冰 王琛
口腔生物医学. 2021, 12(2):  105-109. 
摘要 ( 227 )  
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目的:研究血红素浓度对白色念珠菌(C. albicans)-牙龈卟啉单胞菌(P. gingivalis)双菌生物膜中P. gingivalis致病潜力的影响。方法:在0.1?μg/mL(低)和5?μg/mL(高)血红素培养条件下构建P. gingivalis-C. albicans双菌生物膜以及P. gingivalis单菌生物膜,激光共聚焦显微镜观察生物膜中微生物的存活状况,根据标准曲线测定培养物上清以及菌细胞破碎后上清中P. gingivalis的胰酶样蛋白酶(TLP)活性,K-B纸片琼脂扩散法检测各组中P. gingivalis的药物抵抗性。结果:低血红素培养条件下,与单菌生物膜比较,双菌生物膜中P. gingivalis的活菌数量和生物膜厚度增宽明显增加(P<0.05),生物膜培养液上清和P. gingivalis菌体内TLP活性均高于单菌生物膜(P<0.05),P. gingivalis对头孢唑啉和环丙沙星的耐药率也有所提高,对磺胺甲噁唑均敏感。高血红素培养条件下,双菌生物膜与单菌生物膜之间在生物膜活死比例、TLP活性及药物敏感性方面无明显差异,且其中TLP活性与对头孢唑啉和环丙沙星的抗性均低于低血红素培养条件下的生物膜。结论:低血红素培养条件下,双菌生物膜中的P. gingivalis致病潜力增加。
基于转录组RNA测序分析牙髓炎中的核心基因
高原 张光东 朱晓东 李梦圆 王宇萌 徐青清
口腔生物医学. 2021, 12(2):  110-114. 
摘要 ( 317 )  
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目的:筛选炎症牙髓与健康牙髓的差异表达基因。方法:对5例炎症牙髓样本和6例健康牙髓样本进行转录组RNA测序,筛选差异表达基因,进行生物信息学分析。结果:一共筛选出1?216个差异表达基因,包括831个上调基因和385个下调基因。GO分析结果显示,差异基因主要富集于炎症反应、免疫反应和细胞粘附等功能集中;KEGG通路分析表明,差异基因主要富集于细胞因子-细胞因子受体相互作用、趋化因子信号通路、破骨细胞分化等炎症相关通路。基因集富集分析结果也富集于炎症反应通路、肿瘤坏死因子α信号通路以及IL6/JAK/STAT3信号通路。根据PPI网络中的节点连通度,共筛选出6个与牙髓炎相关的核心基因:PTPRC、ITGAM、CD86、IL10、TLR4和TLR2。结论:炎症牙髓与健康牙髓在整体基因表达上存在较显著的差异,差异表达基因大多富集于炎症和免疫反应的功能及信号通路,相关基因具有作为牙髓炎诊断生物标志物的潜在价值。
3D打印磷酸钙改性PLGA乳液复合支架的研究
孙一丹 马欲杰 王婧 魏欣 韩冰
口腔生物医学. 2021, 12(2):  115-119. 
摘要 ( 226 )  
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目的:3D打印技术结合乳液模板制造不同比例的聚乳酸—羟基乙酸共聚物(PLGA)/β-磷酸三钙(β-TCP)复合支架(PT),筛选出最佳比例,并评估其修复颌面部大段骨缺损的潜能。方法:PLGA溶于二氯甲烷后制成油包水乳液,按比例加入β-TCP混匀后通过3D打印形成支架,按照TCP含量多少记为PT30、PT50、PT70,之后对支架进行一系列结构表征、物理性能及体外生物相容性的检测。结果:随着TCP含量的升高,支架表面粗糙程度增加,孔径和孔隙率大小不受影响(P>0.05),吸水率有明显的升高(P<0.001),力学性能差异不明显(P>0.05),降解时只有PT30支架重量和pH下降最明显(P<0.05),其余两组无明显差异(P>0.05)。PT30、PT50支架无细胞毒性作用,PT70支架因具有细胞毒性而筛去。而细胞黏附数量是由TCP含量增大而增多的,PT30支架也被筛去。结论:PT50支架有良好的吸水性和力学性能,降解速度适合新骨生长,无细胞毒性作用,适合细胞生长黏附。
全牙弓即刻种植即刻修复的临床疗效观察
付钰 赵文华 吕凤仪 李明 朱志军 王瑞霞
口腔生物医学. 2021, 12(2):  120-123. 
摘要 ( 287 )  
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目的:初步评价全牙弓即刻种植即刻修复的临床疗效。方法:回顾性分析2016年1月至2019年12月拔牙后全牙弓即刻种植即刻修复患者17例(上颌4例,下颌7例,全口6例)的临床疗效,平均随访时间24个月(12~36个月)。结果:所有患者均顺利完成整个治疗程序,17例患者共计植入128颗种植体,观察期内无一例发生种植体骨结合失败,2例在术后发生种植体周围黏膜炎,4例临时修复体发生机械并发症,3例永久修复体发生机械并发症,均为冠崩瓷/崩塑;所有患者对咀嚼和美观效果满意。结论:在严格把握适应证、保证种植体植入扭矩的条件下,全牙弓即刻种植即刻修复可以取得理想的临床效果。
近红外荧光导航技术在口腔癌手术中应用的初步研究
孙立凡 王义洲 韩微 祝庆海 侯辰兴 叶金海
口腔生物医学. 2021, 12(2):  124-127. 
摘要 ( 256 )  
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目的:评估近红外荧光导航技术在口腔癌手术中及其手术边界的应用价值。方法:本研究选取14例于南京医科大学附属口腔医院就诊并接受手术治疗的口腔鳞癌患者。每例患者术前6~8?h静脉注射吲哚菁绿注射液0.75?mg/kg。术中、术后使用近红外荧光影像系统进行观测并拍照记录。术后在离体病灶荧光边界内、外侧收取组织标本进行病理学检查。结果:所有患者的病灶均可见肿瘤荧光显影,术后离体病灶的肿瘤背景比值(1.58±0.52)明显高于术中病灶的肿瘤背景比值(1.39±0.39)(P<0.05)。在荧光边界处,其区分正常上皮与非正常上皮(不典型增生及癌组织)的敏感性和特异性分别为83.3%和57.9%。结论:近红外荧光技术可用于检测口腔癌原发灶切除后是否残存肿瘤,可作为确定手术边界的诊疗辅助工具。
综述
SWELL1对细胞体积调控作用的研究进展
唐嘉琪 周亦凝 代杰文
口腔生物医学. 2021, 12(2):  128-131. 
摘要 ( 416 )  
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维持细胞体积的稳态是细胞正常生命过程的重要条件。体积调节阴离子通道(VRAC)在其中发挥了重要的调控作用,可通过有机物质累积和无机离子交换,使细胞膜内外的渗透压达到平衡,调控细胞体积,参与神经系统、免疫系统、代谢和细胞迁移、增殖、凋亡等一系列生物和细胞活动中。富含亮氨酸的重复序列蛋白8A(LRRC8A,又称SWELL1)与其4个同源家族成员是一类重要的VRAC,对细胞体积的调控起重要作用。本文就有关SWELL1结构、对不同细胞体积调控作用及机制的研究进展做一系统综述。
SIRT6在骨代谢中的作用研究进展
王小同 杜娟
口腔生物医学. 2021, 12(2):  132-135. 
摘要 ( 201 )  
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Sirtuin6(SIRT6)属于Sirtuin家族,具有去乙酰化酶和ADP-核糖基转移酶活性,在骨代谢、基因稳定、葡萄糖代谢、脂质代谢、炎性介质调控、肿瘤发生中发挥关键作用。本综述主要总结了SIRT6在骨代谢中的作用、及其相关的分子信号通路。
炎症微环境影响牙周膜干细胞成骨分化的信号通路
骆姝含 张岚 黄定明
口腔生物医学. 2021, 12(2):  136-140. 
摘要 ( 291 )  
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牙周膜干细胞(PDLSC)应用于组织工程学是目前治疗牙周炎骨缺失最有前景的方法之一,然而目前体内应用PDLSC再生牙周组织的效果并不理想,这可能是PDLSC所处的炎症微环境影响其命运所致。因此,本文将从信号通路方面,探讨炎症微环境对PDLSC成骨分化潜能的影响,为其应用于牙槽骨的再生修复提供理论依据。